Sesi latihan pertama menjadi ajang bagi Rossi untuk kembali menebar ancaman pada gelaran MotoGP Assen.
Rossi berhasil menjadi yang tercepat pada latihan tersebut dengan mengungguli para pebalap top lainnya seperti Marc Marquez, Dani Pedrosa dan Jorge Lorenzo.
Sang juara bertahan, Marquez sendiri hanya menempati posisi ke-2 dan terpaut 0,195 detik dari Rossi. Marquez sempat terjatuh meski akhirnya bisa melanjutkan balapan di posisi yang tak terlalu mengecewakan.
Sementara Pedrosa berada di posisi ke-3, terpaut 0,213 detik dari Rossi. Lorenzo menempati posisi ke-4, disusul Pol Espargaro yang duduk di peringkat ke-5 pada sesi latihan pertama kali ini.
Berikut hasil lengkap sesi latihan pertama MotoGP:
| Pos | Rider | Team | Bike | Time | Gap |
|---|---|---|---|---|---|
| 1 | Valentino Rossi | Yamaha | Yamaha | 1m34.357s | - |
| 2 | Marc Marquez | Honda | Honda | 1m34.552s | 0.195s |
| 3 | Daniel Pedrosa | Honda | Honda | 1m34.570s | 0.213s |
| 4 | Jorge Lorenzo | Yamaha | Yamaha | 1m34.772s | 0.415s |
| 5 | Pol Espargaro | Tech 3 | Yamaha | 1m34.927s | 0.570s |
| 6 | Bradley Smith | Tech 3 | Yamaha | 1m35.042s | 0.685s |
| 7 | Maverick Vinales | Suzuki | Suzuki | 1m35.050s | 0.693s |
| 8 | Aleix Espargaro | Suzuki | Suzuki | 1m35.175s | 0.818s |
| 9 | Andrea Dovizioso | Ducati | Ducati | 1m35.223s | 0.866s |
| 10 | Danilo Petrucci | Pramac Racing | Ducati | 1m35.271s | 0.914s |
| 11 | Jack Miller | LCR | Honda | 1m35.348s | 0.991s |
| 12 | Cal Crutchlow | LCR | Honda | 1m35.393s | 1.036s |
| 13 | Andrea Iannone | Ducati | Ducati | 1m35.400s | 1.043s |
| 14 | Stefan Bradl | Forward Racing | Yamaha Forward | 1m35.486s | 1.129s |
| 15 | Yonny Hernandez | Pramac Racing | Ducati | 1m35.924s | 1.567s |
| 16 | Nicky Hayden | Aspar | Honda | 1m35.965s | 1.608s |
| 17 | Scott Redding | Marc VDS | Honda | 1m36.158s | 1.801s |
| 18 | Eugene Laverty | Aspar | Honda | 1m36.223s | 1.866s |
| 19 | Hector Barbera | Avintia Racing | Ducati | 1m36.233s | 1.876s |
| 20 | Alvaro Bautista | Aprilia Gresini | Aprilia | 1m36.250s | 1.893s |
| 21 | Loris Baz | Forward Racing | Yamaha Forward | 1m36.423s | 2.066s |
| 22 | Mike Di Meglio | Avintia Racing | Ducati | 1m36.619s | 2.262s |
| 23 | Alex de Angelis | IodaRacing Project | ART/Aprilia | 1m37.486s | 3.129s |
| 24 | Marco Melandri | Aprilia Gresini | Aprilia | 1m37.933s | 3.576s |